• Predisposition testing. Yatkınlık testi
• Prenatal teşhis. Gebelikte doğum öncesi teşhis

Klinik yöntemler.

Çevirenin Notu: Çevirinin bu sahfasında test yöntemleri detaylı teknik bilgi içerdiği için ingilizce metindeğiştirilmeden yerleştirilmiştir.

• FISH.Deletions of all or parts of the RB1 gene have been identified by FISH analysis using probes derived from sequences of the RB1 gene [e.g., LSI 13 (RB1) 13q14 SpectrumOrange Probe, Vysis, Abbott laboratories]. Note: Because deletions can be detected by quantitative multiplex PCR, a specific role for FISH analysis is identification of mosaicism for deletions of this type. Translocations not visible by any other means are rare.
• Genotyping of polymorphic loci
  • Heterozygosity testing. Comparison of the genotypes of RB1 polymorphic loci in DNA from peripheral blood between the individual and his/her parents can show absence of a parental allele, a finding that may result from a de novo deletion.
  • Testing for loss of heterozygosity in tumors. Comparative genotyping of polymorphic loci within and flanking the RB1 gene in DNA from peripheral blood and tumor can reveal somatic mutations that result in allele loss.
• Targeted mutation analysis
• MRPLA. Identification of gross deletions and duplications; these account for about 15% of oncogenic RB1 mutations.
• Quantitative multiplex PCR and high-resolution fragment length analysis. Identification of gross deletions and duplications as well as small length mutations; together these mutations account for about 30% of oncogenic RB1 mutations [Richter et al 2003].
• Sequence analysis/mutation scanning. Identification of point mutations (base substitutions and small length mutations) which account for about 70% of oncogenic RB1 mutations [Lohmann et al 1996 , Richter et al 2003 , Houdayer et al 2004]. Recurrent CpG-transitions, which account for about 30% of oncogenic RB1 alterations, may be detected by mutation-specific detection methods.

 

• Methylation analysis. Hypermethylation of the RB1 gene promoter is observed in about 10% of sporadic, unilateral retinoblastoma tumors [Zeschnigk et al 1999 , Zeschnigk et al 2004]. In these tumors, analysis of promoter hypermethylation is needed to identify the two inactive RB1 alleles that triggered tumor development.

• Linkage analysis. Linkage analysis using highly informative microsatellite markers within and tightly linked to the RB1 gene can be used in two settings:
  • To track the mutant allele in families with more than two affected individuals. Note: Indirect testing in a two-generation family with an affected parent and an affected child may be unreliable because of the possibility of germline mosaicism in the "founder" parent.
  • To determine if an individual at risk in a family with only one affected individual has inherited either RB1 allele present in the affected individual. If the individual at risk does not have either RB1 allele in common with the affected relative, the individual's risk of developing retinoblastoma decreases to that of the general population [Greger et al 1988 , Wiggs et al 1988].
    Table 1 summarizes molecular genetic testing for this disorder.

Test sonuçlarının yorumu :

• Eğer hastalıktan etkilenmiş kişinin beyaz kan hücrelerin den elde edilen DNA ' da hastalığa sebep olan RB1 mutasyonu bulunursa bu mutasyonun germline mutasyon olma olasılığı yüksektir.
• Beyas kan hücrelerinden alınan DNA' da hastalığa sebep olabilecek mutasyon bulunamadı ise,hastalıktan etkilenen kişide germline mutasyon olma olasılığı düşüktür. Fakat, kişinin hastalığa sebep olabilecek mosaikleşme (mosaicism- iki veya daha fazla hücre hattında farklı gen veya kromosomsal yapılanmaların olması) olma olasılığı vardır. Çünkü mosaikleşmelerin sadece % 20 si tespit edilebilmektedir, beyaz kan hücrelerinden alınan DNA' da RB1 mutasyonunun yokluğu, bireyin germline' ında mutasyon olma olasılığını azaltır, fakat tamamen elimine etmez.

Proband için Test Strajesi

Aile hikayesi olan veya bilateral retinoblastoma olan bireyler için

• İlk olarak DNA üzerinde moleküler genetik test yapılır. Bireylerin büyük bir kısmında mutasyon tespit edilir.
• Bazı bilateral vakalarda, aile hikayesi yok ise kan da kansere sebep olabileck mutasyon bulanabayabilir. Bu tür durumlarda tümörden alınacak örnekten DNA incelenmelidir. Eğer tümörde a) ikili muasyon bulunursa b) bir dizi bozulması bulunursa, tümörde bulunan mutasyonlara göre DNA test edilmelidir. Eğer her iki tip mutasyon yine kan DNA sında bulunamaz ise mutasyonal mosaikleşme olduğu kabul edilir.

Aile hikayesi olmayan ve unilateral retinoblastoma olan bireyler için

• Tümörden alınan örnekte moleküler genetik test yapılır. Amaç RB1 allel' lerinde deaktivasyona sebep olan iki mutasyonu bulmaktır.
• İki mutasyondan birisinin tümörde bulunmasının ardından kan DNA' sı incelenir. Bu tür vakaların % 15 inde hem kanda hemde tümörde RB1 mutasyonlarından birisi tespit edilir.

Genetik ile ilişkili hastalıklar

Retinoblastomaya kalıtımsal yatkınlığın olduğu durumlar ve ikincil kanserler dışındaki fenotipler RB1 mutasyonu ile ilişkili değildir.

KLİNİK TANIM

Doğal Tarih

Retinoblastoma proband'lar genellikle aşağıdaki klinik özellikleri gösterirler.

• 13q14 bandında kromozom eksikliği: Tek odaklı index vakaların %5'inde çok odaklı index vakaların %7.5' inde 13q14 bandında kromozom eksikliği vardır. Bu tür kromozom bozukluğunda gelişim gerilikleri ve doğum sorunları ile de karşılaşılır.
• Sitogenetik test normal izlenir ve aşağıdakilerden birisi gözlenir:
  • Pozitif aile hiakyesi ve tektaraflı veya iki taraflı RB:İndex vakaların %10' u böyledir.
  • Negatif aile hikayesi ve çok odaklı RB : İndex vakaların%30 u böyledir.
  • Negatif aile hikayesi ve tek odaklı RB : İndex vakalrın % 60' ı böyledir.

RB vakalarının %60' ı tek taraflıdır veortalama teşhis süresi 24 aydır. Geri kalan %40 iki taraflıdır ve ortalama teşhis süresi 15 aydır. Pozitif aile hikayesi olan (yaklaşık %10) kişilerde ise fundoskopik muayene yapılageldiği için tümör doğumun peşisıra olan ilk bir kaç ayda tespit edilir.

RB' nın en sık görülen emaresi beyaz kedi gözü reflexidir( leukocoria-lökokori). İkinci en sık rastlanan belirti ise strabismus (gözlerin birisinin odaklanamaması farklı yönlere bakmasıdır) Sık olmayan belirtiler ise glokom, orbita selulit, uveitis, hyphema ve vitreous hemoreji dir.

Bilateral çocukların çoğu ilk muayene teşhis edilirken , çocukların bazılarında ilk teşhis unilateral iken daha sonra gelişen tümörler ile bilateral olabilirler.

Retinoma ilişkili göz lezyonları :Bu lezyonlar retina yaralarından RB' nin kalsifike olamsıyla ortaya çıkan phtisical göze kadar değişir. İyi huylu retina tümörleri (retinocytoma veya retinoma) de bu grubun içine girerler.

İlgili tümörler.RB1 mutasyonu olan bireylerde göz dışında tümör gelişme ihtimali yüksektir. Retina benzeri bir beyin dokusu olan pineal bölgede Pinealoma gelişebilir.Retinoblastoma ile birlikte pinealomanın veya birincil neuroectodermal tümörlerin gelişmesine üç taraflı retinoblastoma denir.Pinealoma, tedavi edilebilir olan Retinoblastomanın aksine sıklıkla ölümcüldür.

Göz dışı ikincil kanserlerin olma olasılığı yüksektir. Bunlar osteosarcoma lar, yumuşak doku sarcoma ları veya melanomalardır.